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細(xì)胞簡介：

小鼠骨髓基質(zhì)分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)細(xì)胞是一類具有多向分化潛能的干細(xì)胞，其中部分細(xì)胞有自我復(fù)制、高度增殖和多向分化能力，在特定培養(yǎng)條件下可向骨、軟骨、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、心肌、骨胳肌、脂肪細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等間葉組織細(xì)胞轉(zhuǎn)化。骨髓基質(zhì)細(xì)胞在自然條件下主要分化為成骨細(xì)胞，在不同的培養(yǎng)條件下其分化途徑不同，其在成骨細(xì)胞與成脂細(xì)胞分化之間呈反向變化。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓基質(zhì)采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓基質(zhì)經(jīng)CD29、CD44免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠Bcl-2樣蛋白1(Bcl2-L-1/Bcl-X)檢測試劑盒 ，英文名： Bcl2-L-1/Bcl-X ELISA Kit

Mouse bone morphogenetic protein 4 (BMP-4) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)檢測試劑盒

MouseFolicacid,FAELISAKit 小鼠(FA)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumahyroglobulin,TGELISAKit人甲狀腺球蛋白

通用型亞鹽熒光定量檢測試劑盒20次

ELISAKitPAPP-A大鼠相關(guān)血漿蛋白A

CX3CL1重組食蟹猴 / 恒河猴 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IAA/BSA 吲哚-3-乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白 5mgIAA/BSA 吲哚-3-乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白

CD160重組人 CD160 蛋白 Protein

GMFB Protein Human 重組人 GMFB 蛋白

TNFRSF4 Protein Mouse 重組小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IAA/BSA 吲哚-3-乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白 5mgIAA/BSA 吲哚-3-乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白

GMFB Protein Human 重組人 GMFB 蛋白

CX3CL1重組食蟹猴 / 恒河猴 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

TNFRSF4 Protein Mouse 重組小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CD160重組人 CD160 蛋白 Protein

小鼠白介素16(IL-16)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat epithelial neuophil activating peptide 78 (ENA-78/CXCL5) ELISA Kit 大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)檢測試劑盒

Humandeoxypyridinoline,DPDELISAKit 人脫氧酚/脫氧啉(DPD)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancailageoligomericprotein,COMP檢測試劑盒人軟骨寡聚蛋白(COMP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因棉花MON1445品系試劑盒20次

HumansmoothmuscleMyosin,SMMELISAKit人平滑肌肌球蛋白(SMM)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞兔子肝細(xì)胞生長因子檢測試劑盒   兔子肝細(xì)胞生長因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子肝細(xì)胞生長因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子肝細(xì)胞生長因子試劑盒、兔子肝細(xì)胞生長因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔血纖蛋白原檢測試劑盒   兔血纖蛋白原試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔血纖蛋白原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔血纖蛋白原試劑盒、兔血纖蛋白原檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔血栓素B2檢測試劑盒   兔血栓素B2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔血栓素B2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔血栓素B2試劑盒、兔血栓素B2 檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔血清淀粉樣蛋白A檢測試劑盒   兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒、兔血清淀粉樣蛋白A 檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。