產(chǎn)品名稱：小鼠鼻黏膜成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品特點：小鼠鼻黏膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251 倉鼠源細(xì)胞 山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1 Mo-MuLv/3T3細(xì)胞，Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,SFPAC-1細(xì)胞 CM-M056小鼠腎實質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C3 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
產(chǎn)品型號：
更新日期：2024-12-16
訪問次數(shù)：351
小鼠鼻黏膜成纖維細(xì)胞的詳細(xì)資料：
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡介：
小鼠鼻黏膜成纖維分離自鼻黏膜組織；黏膜是覆蓋在機體內(nèi)消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu)，由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同，有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結(jié)構(gòu)也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜，簡稱鼻黏膜，覆蓋于鼻腔表面，黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠鼻黏膜成纖維細(xì)胞 | 組織來源 | 鼻黏膜 |
英文名稱 | Mouse Nasal Mucosal Fibroblast Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介：
實驗室分離的小鼠鼻黏膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的小鼠鼻黏膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠鼻黏膜成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠細(xì)胞周期素D1(CCND1)檢測試劑盒 ，英文名： CCND1 ELISA Kit
Mouse three iodothyronine (T3) ELISA Kit 小鼠三甲狀腺原(T3)檢測試劑盒
MouseSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 小鼠S100蛋白(S-100)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHSVII-Ab(HumanHerpessimplexvirusIIaibody)ELISAKit人單皰疹病毒Ⅱ型抗體
細(xì)胞IKKβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitLTE4大鼠白三烯E4
MET重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 Protein
IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3 0.5mgIGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰島素樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗原
EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein
CPNE1 Protein Human 重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)
TSLP Protein Mouse 重組小鼠 TSLP 蛋白
IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3 0.5mgIGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰島素樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗原
CPNE1 Protein Human 重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)
MET重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 Protein
TSLP Protein Mouse 重組小鼠 TSLP 蛋白
EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein
小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ornithine carbamoyl ansferase (OCT) ELISA Kit 人鳥氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)檢測試劑盒
Humanmultidrugresistance-associatedprotein,MRPELISAKit 人多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GuineapigIerleukin-12,IL-12/P70檢測試劑盒豚鼠白介素12(IL-12/P70)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性濾膜染色試劑盒20次
MouseCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISAKit小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠鼻黏膜成纖維細(xì)胞小鼠內(nèi)皮素-1 英文名稱： Endothelin-1 規(guī)格： 英文縮寫： ET-1
小鼠嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子 英文名稱： Eotaxin 規(guī)格： 英文縮寫： Eotaxin
小鼠促紅細(xì)胞生成素 英文名稱： erythropoietin 規(guī)格： 英文縮寫： EPO
小鼠紅細(xì)胞生成素受體 英文名稱： erythropoietin receptor 規(guī)格： 英文縮寫： EPOR
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