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細胞簡介：

心臟壁主要由心肌構(gòu)成，心房壁比心室壁薄。心肌的工作細胞包括心房肌和心室肌。心肌細胞為短柱狀，一般只有一個細胞核，心肌細胞之間有閏盤結(jié)構(gòu)。心房與心室的心肌層不直接相連，它們分別起止于心房和心室交界處的纖維支架，形成各自獨立的肌性壁，從而保證心房和心室各自進行獨立的收縮舒張，以推動血液在心臟內(nèi)的定向流動。

臨床研究表明，在房顫患者心房肌細胞內(nèi)，發(fā)現(xiàn)存在有異常增高的細胞內(nèi)鈣蓄積，并證實心肌細胞內(nèi)鈣超載在心律失常的發(fā)生中起著關(guān)鍵作用。此外，在房顫患者心房細胞內(nèi)也發(fā)現(xiàn)有CaMK Ⅱ的異常高表達。

細胞特性：

1） 組織來源于實驗動物的正常心臟組織。 本細胞為終末分化細胞，增殖能力很弱，建議客戶收到細胞后直接用于后續(xù)實驗，不要進行擴增培養(yǎng)。

2) 細胞鑒定：肌球蛋白重鏈(Myosin heavy chain)熒光染色為陽性。

3) 細胞純度：經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5) 細胞生長方式：柱狀細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 delf原代心肌細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的體外培養(yǎng)試劑。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠白三烯B4(LTB4)檢測試劑盒 ，英文名： LTB4 ELISA Kit

Mouse ierleukin 12 (IL-12/P40) ELISA Kit 小鼠白介素12(IL-12/P40)檢測試劑盒

ELISA 小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon)  進口分裝

CLIAKitfori-PTH(MouseiactParathormone)ELISAKit小鼠全段甲狀旁腺素

通用型非蛋白/游離巰基含量比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitADP大鼠脂聯(lián)素

CA8重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白 Protein

CD200受體1(CD200R1)重組蛋白 Recombinant CD200 Receptor 1 (CD200R1)

IP6K1重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白

FCAR Protein Rat 重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白

脯氨酰羧肽酶(PRCP)重組蛋白 Recombinant Prolylcarboxypeptidase (PRCP)

EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白

CCL3重組小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein

SERPINC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SerpinC1 / AntithrombinIII / ATIII 蛋白

CD3D & CD3E重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白 Protein

小鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) ELISA Kit 大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)檢測試劑盒

Humanprotocadherin1,PCDH1ELISAKit 人原鈣黏素1(PCDH1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-livercytosolaibodytype1,LC1檢測試劑盒人抗肝細胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)粗提分離試劑盒10次

Humanvanillylmandelicacid,VMAELISAKit人垂草扁桃酸(VMA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠心房心肌細胞小鼠白介素23(IL-23)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素2(IL-2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。